RESUMO Objetivo: avaliar a eficácia de três marcadores imunoistoquímicos envolvidos no processo de cicatrização de ferida cirúrgica. Métodos: estudo experimental em 40 ratos da raça Wistar, dos marcadores metaloproteinases e metaloproteinase da matriz 9 (MMP-9), fator de transformação do crescimento beta (TGF-β) e miofibroblasto e alfa actina de músculo liso (α-AML), estudados a partir de fragmentos de cicatriz cirúrgica de incisão abdominal envolvendo pele, aponeurose e peritônio. Os animais foram distribuídos em quatro subgrupos de dez de acordo com o dia da morte, programada em três, sete, 14 e 21 dias. Resultados: na expressão da MMP-9 ocorreu aumento progressivo de sua concentração, mais evidente do 7º ao 14º dias variando a imuno-expressão tecidual entre 2,65% e 11,50%.TGF- β mostrou expressão em nível alto no 3º dia, caiu no 7º, voltando a subir no 14º, com pequena queda no 21º dia variando a imuno-expressão tecidual entre 0,03% e 2,92%. A α-AML apresentou níveis com pouca variação e discreto aumento variando a imuno-expressão tecidual entre 0,88% e 3,23%. Conclusão: a MMP-9 se apresentou como melhor marcador, seguido pela TGF-β. Já o α-AML não se mostrou um bom sinalizador da evolução da reparação tissular.

ABSTRACT Objective: to evaluate the efficacy of three immunohistochemical markers involved in the wound healing process. Methods: experimental study of 40 Wistar rats of the markers metalloproteinases and matrix metalloproteinase 9 (MMP-9), beta transforming growth factor (TGF-β) and myofibroblasts and smooth muscle actin alpha (α-MLA) markers, studied from fragments of surgical scar of abdominal incision involving skin, aponeurosis and peritoneum. The animals were divided into four subgroups of ten according to the day of death, scheduled in three, seven, 14 and 21 days. Results: MMP-9 expression showed a progressive increase of its concentration, more evident from 7th to 14th days, varying the tissue immunoexpression between 2.65% and 11.50% . TGF- β showed expression at high level on the 3rd day, fell in the 7th, rising again in the 14th, with a small decrease in the 21st day, varying the tissue immunoexpression between 0.03% and 2.92%. The α-AML presented levels with little variation and a slight increase, varying the tissue immunoexpression between 0.88% and 3.23%. Conclusion: MMP-9 presented as the best marker, followed by TGF-β. However, α-AML was not a good indicator of the evolution of tissue repair.

OBJETIVO: Avaliar a imunoexpressão dos receptores de estrogênio e progesterona em biópsias e peças cirúrgicas de pacientes com câncer de mama pré e pós-quimioterapia neoadjuvante e correlacionar suas alterações com o padrão de resposta à quimioterapia e diagnóstico de menopausa. MÉTODOS: Selecionaram-se 47 pacientes com diagnóstico histopatológico de carcinoma primário de mama localmente avançado. Para cada paciente existiam dois blocos: o espécime da biópsia e o da ressecção cirúrgica. A partir destes blocos foi avaliada a expressão dos receptores hormonais por imunoistoquímica com a técnica da streptoavidina-biotina-imunoperoxidase e anticorpos primários anti-RE e anti-RP. A análise estatística utilizou o teste paramétrico t de Student e o não-paramétrico exato de Fisher, com nível de significância de 5%. RESULTADOS: Das 47 pacientes, 30 apresentavam imunoexpressão positiva dos receptores hormonais. Observou-se redução significativa tanto nos níveis de receptor de estrogênio e progesterona quanto em sua imunoexpressão. Em 53,3% observaram-se mudanças nos níveis expressos de receptor de estrogênio, 56,6% em receptor de progesterona, 26,6% na imunoexpressão do receptor de estrogênio e 33,3% na imunoexpressão do receptor de progesterona. Não foi encontrada significância estatística ao correlacionar-se a influência da resposta à quimioterapia e do diagnóstico de menopausa nas pacientes com a variação na expressão dos receptores hormonais. CONCLUSÃO: A quimioterapia neoadjuvante alterou significativamente a imunoexpressão dos receptores hormonais nas pacientes da amostra, reduzindo sua positividade nas células tumorais.

OBJECTIVE: To evaluate the immunoexpression of estrogen and progesterone receptors in biopsies and surgical specimens of patients with breast cancer before and after neoadjuvant chemotherapy and to correlate their changes with the pattern of response to chemotherapy and diagnosis of menopause. METHODS: We selected 47 patients with histological diagnosis of locally advanced primary breast carcinoma. For each patient there were two blocks: the biopsy specimen and surgical resection one. From these blocks hormone receptor expression was assessed by immunohistochemistry using the technique of streptoavidin-biotin-immunoperoxidase and anti-ER and anti-PR primary antibodies. The statistical analysis used the Student's t test and the nonparametric Fisher's exact test, with significance level of 5%. RESULTS: Of the 47 patients, 30 showed positive immunostaining for hormone receptors. There was significant reduction in the levels of both estrogen and progesterone receptors and in their immunoreactivity. In 53.3% we observed changes in levels of estrogen receptor expression, 56.6% in the progesterone receptor, 26.6% in the immunoexpression of estrogen receptor immunoreactivity and 33.3% in the immunoreactivity of the progesterone receptor. There was no statistical correlation between the influence of the response to chemotherapy and the diagnosis of menopause in women with variation in the expression of hormone receptors. CONCLUSION: Neoadjuvant chemotherapy has significantly altered hormone receptor immunoreactivity in patients in the sample, reducing its positivity in tumor cells.

OBJETIVO: Avaliar a cicatrização da ferida incisional da parede abdominal de ratos hepatectomizados quanto à concentração de colágeno, reação inflamatória e angiogênese. MÉTODOS: Utilizaram-se 48 ratos distribuídos aleatoriamente para laparotomia com e sem hepatectomia. As cicatrizes foram estudadas no 3º, 7º e 14º dia de pós-operatório. Analisou-se a densidade do colágeno por método histoquímico e a angiogênese por método imunohistoquímico. RESULTADOS: A análise do colágeno total mostrou menor concentração no plano da pele e da tela subcutânea, nas cicatrizes abdominais do grupo experimento (p3=0,011; p7=0,004 e p14=0,008). A densidade de colágeno I foi inferior no grupo hepatectomizado, principalmente no 3º dia, tanto na pele e tela subcutânea (p=0,038) quanto no plano aponeurótico (p=0,026). Houve menor concentração de colágeno III nos dois planos estudados, embora não significante. A resposta inflamatória foi semelhante em todos os tempos, nos dois grupos. Verificou-se que a angiogênese desenvolveu-se mais precocemente no grupo controle (p3=0,005 e p7=0,012) e mais tardiamente no grupo experimento (p14=0,048). CONCLUSÃO: A hepatectomia leva ao atraso do processo cicatricial, interferindo na síntese do colágeno e na angiogênese.

OBJECTIVE: To evaluate the wound healing of the abdominal wall incision in hepatectomized rats as for the concentration of collagen, inflammatory reaction and angiogenesis. METHODS: We used 48 rats randomly assigned to laparotomy with or without hepatectomy. The scars were studied in the 3rd, 7th and 14th postoperative days. We analyzed the density of collagen by the histochemical method and angiogenesis, by immunohistochemistry. RESULTS: The analysis showed a lower total collagen concentration in skin and subcutaneous tissue in the abdominal scars of the experiment group (p3 = 0.011, p7 = 0.004 and p14 = 0.008). The density of collagen I was lower in the hepatectomy group, especially in the third day, in the skin, subcutaneous tissue (p = 0.038) and in the aponeurotic plane (p = 0.026). There was a lower concentration of collagen III in the two abdominal wall layers studied, although not statistically significant. The inflammatory response was similar at all times in both groups. It was found that angiogenesis was developed earlier in the control group (p3 = 0.005 and p7 = 0.012) and later in the experimental group (p14 = 0.048). CONCLUSION: Hepatectomy leads to a delay in the healing process, interfering with collagen synthesis and angiogenesis.

O objetivo neste estudo foi caracterizar o desenvolvimento subcutâneo do tumor de Walker 256 (W256) AR, uma variante regressiva do tumor de W256 A de rato. Ratos Wistar foram injetados com 4x10(6) células tumorais de W256 A ou W256 AR. O desenvolvimento tumoral foi avaliado diariamente. Nenhum dos tumores W256 A (n=20) regrediu, mas 62% dos ratos com tumor W256 AR apresentaram regressão completa dos tumores em até 35 dias. O crescimento contínuo dos tumores AR foi caracterizado pelo aumento da taxa de crescimento tumoral a partir do dia 12, alcançando valores maiores que 1,0g/dia, que foram significativamente superiores (p<0,05) aos valores de taxa de crescimento dos tumores regressivos AR. A imunossupressão por irradiação precedendo a injeção das células tumorais AR eliminou completamente a regressão tumoral e favoreceu disseminação metastática severa. Este estudo caracterizou o desenvolvimento do tumor de W256 AR em condições específicas, documentando a regressão espontânea deste tumor após a injeção subcutânea de altas doses de células tumorais em ratos Wistar. A avaliação diária da taxa de crescimento tumoral permite discriminar precocemente os tumores com crescimento continuo daqueles que são regressivos. A taxa de crescimento tumoral é um parâmetro útil para a avaliação dos animais experimentais, particularmente no período que precede a regressão dos tumores.

The present study aimed at characterizing the subcutaneous development of the Walker 256 (W256) AR tumor, a regressive variant of the rat W256 A tumor. Wistar rats were injected subcutaneously with 4x10(6) W256 A or W256 AR tumor cells. The development of tumors was evaluated daily by percutaneous measurements. None of the W256 A tumors (n=20) regressed, but 62% of the W256 AR tumor-bearing rats (n=21) underwent complete tumor regression within 35 days. Continuous growth of AR tumors was characterized by an increase of the tumor growth rate from day 12, which reached values above 1.0 g/day, and were significantly higher (p<0.05) than those of the regressive AR tumors. Immunosuppression by irradiation before subcutaneous injection of AR cells completely abrogated tumor regression and was associated with severe metastatic dissemination. Daily evaluation of the tumor growth rate enabled the discrimination, in advance, between continuously growing tumors and those that regressed later on.

RACIONAL: A Pfaffia glomerata é planta utilizada na medicina popular como tônico, antidiabético, para melhorar o processo de cicatrização, neutralizar distúrbios gástricos e antirreumático. OBJETIVOS: Comparar a contração da ferida e a neovascularização com o uso da Pfaffia glomerata e do laser de baixa potência em dorso de ratos. MÉTODOS: Foram utilizados 40 ratos da linhagem Wistar nos quais realizaram-se feridas cirúrgicas com punch de 3 mm de diâmetro na parte superior direita do dorso onde nenhuma substância foi aplicada e nesses mesmos animais foram também realizadas feridas cirúrgicas no lado esquerdo na região inferior, onde foi aplicado o extrato das raízes de Pfaffia glomerata (Spreng.) Pedersen, Amaranthaceae, obtendo-se desta maneira os grupos controle e planta nos mesmos animais. Em outros 40 animais, foi utilizado o laser de baixa potência. Nas datas programadas em 48 horas, uma, duas e três semanas foram tomadas as medidas da contração da ferida. Microscopicamente os resultados foram analisados utilizando-se imunoistoquímica como fator VIII para observar a densidade vascular. RESULTADOS: Macroscopicamente não houve diferença estatisticamente significante com relação à contração da ferida entre os grupos planta e laser, obtendo ambos resultados superiores ao grupo controle. Dentro desta variável, o resultado com diferença estatisticamente significante ocorreu dentro do grupo laser na comparação dos subgrupos: 48 horas vs. uma semana (p=0,008). A análise do Fator VIII mostrou significância estatística no subgrupo de uma semana da planta em relação ao laser(p=0,09). CONCLUSÕES: Não houve diferença estatisticamente significante com relação à contração da ferida entre os grupos planta e laser, obtendo ambos resultados superiores ao grupo controle no final do estudo; contudo, microscopicamente, o grupo planta obteve valor superior ao grupo laser quanto à neovascularização em uma semana, mas após esse período, houve equilíbrio com os outros grupos.

BACKGROUND: Pfaffia glomerata is a plant used in folk medicine as tonic, antidiabetic, to improve the healing process, neutralize stomach upset and antirheumatic. AIM: To compare the wound contraction and the neovascularization with the use of plant extract of Pfaffia glomerata (Spreng.) Pedersen, Amaranthaceae, and low power laser in rats. METHODS: It was used 40 Wistar rats in which surgical wounds with a punch of 3 mm in diameter at the top right of the back and no substance was applied at this site, and similar wounds in the lower left side had applicated extract of P. glomerata (Spreng.) Pedersen, Amaranthaceae, control groups and plants in the same animal. Another 40 animals had the low power laser application. On dates scheduled within 48 hours, one, two and three weeks measures were taken and wound contraction observed. Microscopic results were analyzed using immunohistochemistry with Factor VIII to observe the vascular density. RESULTS: It was possible to observe macroscopically no statistic significant difference with respect to the contraction of the wound between the groups plant and laser, both getting better results than the control group. This variable showed a statistical significance with the laser group when was compared the subgroups 48 hours X one week (p=0,008). Statistical analysis of Factor VIII showed an statistic significance in subgroup one week of the plant with the laser (p=0.09). CONCLUSIONS: There was no statistic significant difference between the plant and laser groups with respect to contraction of the wound. On microscopic analysis, the group plant earned more than the laser group with relation to neovascularization in subgroup one week, and after that occured a balance between them.

RACIONAL: O câncer de estômago ocupa o terceiro lugar das neoplasias malignas em todo o mundo e é a segunda causa de morte por câncer. No entanto, sua incidência está em declínio nos últimos anos, principalmente em paises como Estados Unidos, Inglaterra e Austrália, assim como onde a sua incidência sempre foi alta - Japão, China, Coréia e Leste da Ásia -, com estimativa de 780 casos anuais por 100 mil habitantes. OBEJTIVOS: Descrição da expressão citofotométrica dos marcadores Ki-67 e CD34 e comparação entre a expressão deles no adenocarcinoma de estômago. MÉTODOS: Foram selecionados inicialmente 60 blocos com espécime de adenocarcinoma gástrico coletados nos serviços de patologia do Hospital do Gama - Brasília, DF e Hospital Dom Orione - Araguaina,TO. A imunoistoquímica com os marcadores Ki-67 e CD34 foi feita no Laboratório de Citologia e Histopalogia Ltda - CITOLAB, Curitiba, PR. Foram aproveitados do total 35 blocos para o estudo histológico e imunoistoquímico que foram analisados pelo sistema de citometria de imagem computarizado SAMBA 4000 no Instituto de Pesquisas Médicas do Hospital Universitário Evangélico de Curitiba. Foram estudados o índice de marcagem e a densidade óptica para ambos os marcadores analisados separadamente e depois comparados. RESULTADOS: Das 35 lâminas, 15 (42,85%) marcaram o Ki-67; 26 (74,28%) o CD34 e 12 lâminas (34,28%) marcaram com os dois marcadores. Quando se comparou o índice de marcagem entre Ki-67 e CD34, observou-se que existe diferença significativa (P<0,001) a favor do CD34. Quando se comparou a densidade óptica entre ambos, observou-se que existe diferença significativa (P<0,001) a favor do CD34. CONCLUSÕES: A média do índice de marcagem do marcador Ki-67 foi de 36,85%, e a da densidade óptica de 29,33 pixels. O CD34 teve como índice de marcagem 84,86% e 49,84 pixels de média para a densidade óptica. Quando se comparou o índice de marcagem entre ambos, observou-se que existe diferença significativa a favor do CD34. Quando se comparou a densidade óptica entre ambos também observou-se que existe diferença significativa a favor do CD34.

BACKGROUND: Stomach cancer is rated as the third malignant neoplasm in the world, being the second most frequent cause of death. However, its incidence has been declining in the last few years in countries like the United States, England and Australia, and in countries where its incidence has always been high - Japan, China, Korea and in the Eastern part of Asia, which has an estimated 780 cases per year per 100,000 inhabitants. AIM: To describe the cytophotometric expression of Ki-67 and CD-34 with comparison to their expression in stomach adenocarcinomas. METHODS: 60 paraffin blocks containing specimens of gastric adenocarcinomas, were initially selected in the Pathology services of the Gama Hospital - Brasília, DF an at the Dom Orione Hospital - Araguaiana, TO. The immunohistochemistry process using Ki-67 and CD-34 was performed at the Laboratório de Citologia e Histopatologia Ltda. -CITOLAB, Curitiba, PR. A total of 35 paraffin blocks were selected among the other 60 previously selected, being used in histological studies as well as for the immunohistochemistry process. These were analyzed using the computerized image cytophotometric system (SAMBA 4000) at the Institute of Medical Research of the Hospital Universitário Evangélico de Curitiba. The parameters studies and analyzed through this system were the labeling index and optical density for both of the tumoral markers being independently analyzed and latter compared with each other. RESULTS: Of the 35 slides, 15(42,85%) showed the expression of Ki-67; 26 (74,28%) of CD-34 and 12 slides (34,28%) showed the expression of both markers. When the labeling indexes between Ki-67 and CD-34 were compared, a significant difference was observed (P<0,001) favoring CD-34. When the optical density of the two markers was compared, a significant difference (P<0,001) was also observed, favoring CD-34. CONCLUSIONS: The average labeling index for Ki-67 was of 36,85%, where as the optical density was of 29,33 pixels. CD-34 showed a labeling index of 84,86% and an average 49,84 pixels regarding the optical density. When the labeling index and optical density were compared between both of the markers, a significant difference was established favoring CD-34 in both of the parameters analyzed.

RACIONAL: A carcinogênese gástrica é processo complexo e depende de fatores genéticos, ambientais e infecciosos. Nos últimos anos, houve grandes avanços nos campos da genética e da biologia molecular, sobre o desenvolvimento dos tumores. Os marcadores tumorais são substâncias ausentes nos tecidos normais e que podem ser identificadas em tecidos com câncer. Através de procedimentos imunoistoquímicos eles podem ser estudados. OBJETIVOS: Descrever a expressão citofotométrica do marcador tumoral Ki-67 analisando a densidade óptica e o índice de marcagem no adenocarcinoma de estômago. Descrever a expressão citofotométrica do marcador tumoral Caspase-3 analisando a densidade óptica e o índice de marcagem no adenocarcinoma de estômago. Comparar o índice de marcagem e densidade óptica dos marcadores tumorais Ki-67 e Caspase-3 no adenocarcinoma de estômago. MÉTODO: Foram selecionados, inicialmente, 58 blocos com espécime de adenocarcinoma gástrico coletados nos Serviços de Anátomo-Patologia do Hospital do Gama - Brasília (DF) e Hospital Dom Orione - Araguaina (TO), e analizados no Laboratório de Citologia e Histopalogia Ltda - CITOLAB, Curitiba (PR). Foram aproveitados 31 blocos para o estudo histológico e imunoistoquímico realizado pelo sistema de análise computarizado SAMBA 4000. RESULTADOS: Das 31 lâminas estudas, 15 (48%) foram marcadas pelo marcador Ki-67, 22 (71%) foram marcadas pelo marcador Caspase-3 e 14 (45%) marcaram com os dois marcadores. CONCLUSÕES: A expressão citofométrica do marcador Ki-67 foi observada em 15 lâminas da amostra estudada e apresentaram média do índice de marcagem de 36,85%, enquanto a densidade óptica apresentou média de 29,33 pixels. A expressão citofotométrica do marcador Caspase-3 foi observada em 22 lâminas da amostra estudada e apresentaram média do índice de marcagem de 87,71% e 60,74 pixels de média para a densidade óptica. Na comparação do índice de marcagem dos marcadores Ki-67 e Caspase-3 com a leitura de 14 lâminas, observamos que existe diferença significativa (P<0,001) em favor do marcador Caspase-3, o mesmo aconteceu para a densidade óptica também com diferença significativa (P<0,001).

BACKGROUND: Gastric tumorigenesis is a complex mechanism where genetic, enviromental and infeccious interferences may occur. In the last few years, advances in molecular biology brought a new way in the research of the malignancies using tumoral markers and imunohistochemistry. AIM: To describe the cytophotometric expression of tumoral markers Ki-67 and caspase-3, analyzing optical density and labeling index as parameters in gastric adenocarcinoma. To compare the labeling index and optical density of Ki-67 and Caspase-3 in gastric adenocarcinoma. METHODS: Fifty eight paraffin blocks containing gastric adenocarcinomas specimens were collected in the Serviços de Anátomo-Patologia do Hospital do Gama - Brasília (DF) and Hospital Dom Orione - Araguaina (TO), being analyzed at CITOLAB - Cytology and Hystopathology Laboratory Ltda, in Curitiba (PR). A total of 31 of the blocks were used for hystological studies. Immunohistochemistry was performed utilizing the SAMBA 4000 computerized analysis system. RESULTS: Of the 31 slides studies, 15 (48%) were marked by Ki-67, 22 (71%) were marked by Caspase-3 and 14 (45%) were marked by both of the tumoral markers. CONCLUSIONS: Cytophotometric expression of Ki-67 was observed in 15 of the slides studied, presenting an average labeling index of 36,85%, where as the optical density showed an average of 29,33 pixels. Cytophotometric expression of Caspase-3 was observed in a total of 22 slides, presenting an average labeling index of 87,71% and optical density of 60,74 pixels. When comparing the labeling indexes of both of the tumoral markers Ki-67 and Caspase-3 concerning the 14 slides analyzed, a significant difference (P<0,001)